中西化玻仪器

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牛奶总蛋白检测试剂盒 型号:BBA15NNZDB 货号:
一. 简介
1.试剂盒描述
中西公司牛奶总蛋白质检测试剂盒是用来检测牛奶、奶粉、奶油、冰激凌及巧克力饮品中生物蛋白含量,其原理的依据是AOAC认证的牛奶蛋白质含量检测方法:一种特制的染料可以与乳制品中的蛋白质结合,造成染料含量的变化,通过检测染料含量的变化来判定蛋白质的含量。该试剂盒为国家质量管理部门及食品生产厂家提供了快速的检测方法。
中西公司牛奶总蛋白质检测试剂盒不同于传统的凯氏定蛋法,它可以避免通过添加三聚氰胺等物质来增加含N量的情况出现,该试剂盒有以下特点:
 快速、简便,10分钟内出结果
 需样量少
 高灵敏度、高重复性
 不受三聚氰胺的影响(≤2mg/ml)
2.试剂盒原理
MaxSignalTM牛奶总蛋白质检测试剂盒是在490nm下,通过检测染料消耗量的多少来判定样品中蛋白质的含量,其中,染料的消耗是由乳制品中的蛋白质与染料的结合造成。
3. 试剂盒组成部分和储存
(1)试剂盒包括:
酶标板(可拆式) 12×8 孔
标准液(0%白色帽、1%黄色帽、2.5%桔色帽、
2.8%粉红色帽、3.1%紫色帽、4%蓝色帽) 6×1.6mL
染色剂 2×26ml
(2)试剂盒的保存
本试剂盒在常温下保存。
(3)可检测的样品
均质牛奶(包括原奶)
低脂牛奶
奶粉
奶油
冰激凌
巧克力饮品
4.其他需要而本试剂盒未提的设备或材料
 含490nm滤光片酶标仪或紫外分光光度计(效果更佳)
 1cm的比色杯(玻璃、石英、聚苯乙烯)或微孔板
 微量离心管
 微量离心机
二.警告
实验前请阅读以下文字,以保证获得最佳实验效果。
 不要使用过期的试剂盒。
 不同批次的试剂盒不要混用
 尽量保持室温20-25℃
 避免染料试剂直接暴露在阳光下
 请确保使用去离子水
 加样时确保枪头充分接触微孔壁

三. 检测方法
1.样品准备
1.1牛奶及液态乳品
(1)液态样品科直接用来检测
(2)检测前确保样品正确储存,2-4°C不超过于1-2天
1.2粉末状样品
(1)先将粉末状样品用适量的水溶解(9-10ml水/g)
(2)剧烈晃动30min,充分溶解(最好过夜)
注意:稀释倍数=ml水/g,例如,1g奶粉中加入10ml水,稀释倍数即为10
2.反应测试步骤
(1)标准曲线的制作:从6个标准品中分别取出1.25ml移入干净管中,每管中再分别加入70ul水,以六个标准品的蛋白浓度为横坐标,其对应490nm的OD值为纵坐标,做标准曲线,如果R2≥0.99,说明该酶标仪的读数可以用来准确计算蛋白浓度。
(注意:使用本试剂盒检测乳牛奶中蛋白质时,标准曲线并非必需,它只是用来检测每个实验室中分光光度计和酶标仪的准确度。)
(2)样品:将70ul样品加入到1.25ml染色剂中,同时将70ul水加入到1.25ml染色剂中做空白对照(建议样品和对照都做两个平行)
(3)分别将上步处理好的标准品和样品混匀30秒
(4)室温下11000rpm离心4min(转速低可适当延长离心时间)
(5)分别取0.7ml样品和标准品上清液到一干净离心管中,避免取到管底的沉淀物和表层的油脂物(从管中部取)
(6)将所需量的上清液与一定量的水按下表混合均匀,为检测液
(7)每个微孔中加入300ul检测液(比色杯加入1000ul或3000ul检测液),490nm下检测OD值
每孔/每个比色杯中需要加入液体的量:
装置 上清液体积 水的体积 上样的总体积
一个微孔 10ul 290ul 300ul
1ml比色杯 33ul 967ul 1000ul
3ml比色杯 100ul 2900ul 3000ul

3.数据分析
%蛋白=7.22×(1-As/AB)
As:样品平均吸光度
AB:空白平均吸光度
中西集团为您提供了Excel标准曲线制作软件,以便更准确的检测。

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